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芝麻酚的化學(xué)名是3,4-亞甲二氧基苯酚,是一種脂溶性木酚素類化合物,具有強的抑菌、抗突變、抗氧化等生理活性。它最初是從芝麻油中提取出來的,當(dāng)然也可以通過化學(xué)合成的方法獲得,被廣泛的應(yīng)用在食品和醫(yī)藥領(lǐng)域。它的化學(xué)式為C7H6O3,分子量為138.12,微溶于水,易溶于乙醇和DMSO等。
常用的檢測方法:高效液相色譜(HPLC)或質(zhì)譜(MS)等。
1.樣品處理
稱取2g樣品,放入聚四氟乙烯離心管中,加入2ml的90%乙腈水溶液,旋渦振蕩2min混勻。超聲提取10min,離心5min,吸取乙腈層溶液到10ml容量瓶,殘余的再用2ml的90%乙腈提取一次,混合到容量瓶中,用水定容到10ml,過0.22um膜,待測。
2.色譜條件
C18色譜柱,250x4.6mm,5um;柱溫30℃;乙腈:水=10:90為流動相,等度洗脫,流速0.5-1ml/min;紫外檢測器,波長290nm;進樣量10uL,根據(jù)雜質(zhì)的程度調(diào)整。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線
將芝麻酚的標(biāo)準(zhǔn)品進行溶解制成1mg/ml,梯度稀釋到6個濃度點,確保這些點在檢測限范圍內(nèi)。進樣到HPLC中,測出對應(yīng)的色譜峰,記錄保留時間和峰面積。將每個峰面積和它對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,獲得回歸方程,相關(guān)系數(shù)1>R2>0.999。
4.樣品測定
進樣HPLC測出色譜峰,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間,可以找到樣本溶液色譜圖中的目標(biāo)色譜峰。對峰進行手工或自動的積分處理,將峰面積代入到回歸方程,可計算出樣品中的芝麻酚含量。