freetripdeals.com
川陳皮素主要是從蕓香科植物柑橘類(如陳皮)中提取出來的一種黃酮類的化合物,具有抗氧化,抗炎,保護心血管等生物活性?;瘜W式是C21H22O8,分子量為402.39,含多個甲氧基和羥基,決定其生物活性。廣泛應用在醫(yī)藥研發(fā),食品加工等行業(yè)。川陳皮素微溶于水,而易溶于甲醇、乙醇、丙酮、醋酸、乙醚等有機溶劑。
科研實驗室常用的檢測方法是高效液相色譜(HPLC)或液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)。
1.樣品處理
將樣品粉碎研磨,過24目篩,精密稱量0.2g,放到具塞錐形瓶中,精密加入25mL的甲醇,一起稱取重量后就開始進行超聲處理了。超聲波設置300W的功率,頻率調(diào)整為40kHz,超個45分鐘,放冷,再稱量一次看看重量有沒有變少。如果真的變少了,就用甲醇來補足一下。這個時候,就是要微調(diào)的添加,不能加多了。然后就要搖勻,0.45um膜過濾一下,準備檢測。
2.色譜條件
C18色譜柱,250mm長,4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑,柱溫25℃;以乙腈和水為流動相,梯度洗脫,流速1ml/min;紫外檢測器,波長330nm,進樣量5-10uL。
3.標準曲線
稱取川陳皮素的對照品適量,加入甲醇配置成25ug/mL的標準溶液母液。再對它進行成倍的稀釋,形成6個逐漸降低的濃度點。確保濃度在檢測限的有效范圍,這樣測出來的數(shù)據(jù)才是準確的。進樣到HPLC,測出各個濃度點的色譜峰,記錄保留時間。對色譜峰進行積分和它的標準溶液濃度一起,就能擬合出標準曲線,得的回歸方程。其中,回歸方程的相關系數(shù)1>R>0.999。
4.含量計算
進樣到HPLC中記錄色譜峰的情況,根據(jù)保留時間可以找到樣品的色譜峰,對這個色譜峰的面積積分,代入到回歸方程,就計算出樣品中的川陳皮素含量。