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鉤藤堿是從茜草科植物鉤藤的帶鉤的枝條上提取出來的一種吲哚類生物堿，它的化學(xué)式為C22H28N2O4，分子量為384.46，可溶于氯仿、乙醇、丙酮，微溶于乙醚和醋酸乙酯，幾乎不溶于石油醚。鉤藤堿具有多種生物 活性，比如抗炎，保護(hù)神經(jīng)等作用。除此之外，還有異去氫鉤藤堿，去氫鉤藤堿，異鉤藤堿等?！侗静菡饕分杏涊d，鉤藤具有"舒筋除眩，下氣寬中。"的作用。

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)鉤藤堿的含量，主要通過高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行分離和測(cè)定。

1.樣品處理

就是從中藥材鉤藤中將鉤藤堿給提取到溶液中，便于后續(xù)的HPLC的測(cè)定。之前我們了解過，鉤藤堿是可溶于氯仿、乙醇、甲醇等有機(jī)溶劑。因此，就需要將樣品進(jìn)行粉碎后，加入甲醇溶劑，在超聲波的作用下提取。如甲醇浸提24h，超聲30min，0.45um膜過濾待測(cè)。

2.色譜條件

C18色譜柱，250x4.6mm，5um；柱溫28℃。紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)254nm。以甲醇和水（55:45）為流動(dòng)相，等度洗脫，流速為1.0ml/min，進(jìn)樣量10-20uL（根據(jù)雜質(zhì)的程度選擇適當(dāng)?shù)倪M(jìn)樣量）。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

準(zhǔn)確稱取5mg的鉤藤堿標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶液進(jìn)行溶解，定容到5mL得到1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)母液。然后，用甲醇進(jìn)行梯度稀釋6個(gè)濃度點(diǎn)，在檢測(cè)限的范圍內(nèi)。在進(jìn)樣之前，要對(duì)溶液進(jìn)行脫氣處理。以上述的色譜條件，進(jìn)樣到HPLC，記錄出峰的時(shí)間和峰圖。對(duì)峰面積進(jìn)行積分處理，并結(jié)合對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，擬合出來標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，相關(guān)系數(shù)r2要大于0.999并接近于1。

4.含量計(jì)算

將樣品溶液進(jìn)樣到HPLC中，根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間，識(shí)別出目標(biāo)色譜峰。對(duì)色譜峰面積進(jìn)行手工或自動(dòng)積分，代入到回歸方程，可以計(jì)算出樣品溶液中的鉤藤堿含量。