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熊果苷是從杜鵑花科植物熊果的葉片中分離出來(lái)的一種天然活性物質(zhì)，主要存在于熊果，橘樹(shù)，梨樹(shù)等葉子中?；瘜W(xué)式為4-羥基苯基-D-吡喃葡萄糖苷，化學(xué)式為C12H16O7，分子量為272.251，易溶于熱水、甲醇、乙醇及丙二醇、丙三醇，但不溶于乙醚、氯仿、石油醚等溶劑。它的化學(xué)結(jié)構(gòu)包括1個(gè)對(duì)羥基苯環(huán)和1個(gè)D-吡喃葡萄糖基團(tuán)。根據(jù)結(jié)構(gòu)不同，可以分為α型和β型。通過(guò)抑制體內(nèi)酪氨酸酶的活性，阻止黑色素的生成，同時(shí)還具有殺菌、消炎等作用，主要用于化妝品生產(chǎn)中。

實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)方法，包括高效液相色譜（HPLC）法。這里以HPLC為例，簡(jiǎn)單的介紹一下流程。

1.樣品處理

準(zhǔn)確稱取樣品0.5g，放到50ml的具塞錐形瓶中，加入20ml的純凈水或去離子水。在超聲波的作用下振蕩20min，將溶液轉(zhuǎn)移到50ml的容量瓶中，用水稀釋到50ml的刻度，混勻。吸取部分的溶液12000r/min離心10min，上清液用0.45um膜過(guò)濾待測(cè)。

2.色譜條件

C18色譜柱，250mm長(zhǎng)，4.6mm內(nèi)徑，5um粒徑，柱溫為室溫。以甲醇和水（15:85）為流動(dòng)相，流速1ml/min。紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)280nm，進(jìn)樣量10ul。僅供參考。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

將熊果苷的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行溶解和稀釋?zhuān)室欢ǖ谋壤蛱荻?，濃度的最低點(diǎn)在檢測(cè)限范圍內(nèi)，一般為5-7個(gè)濃度點(diǎn)。在色譜條件下，進(jìn)樣到HPLC中，軟件記錄色譜峰的保留時(shí)間，對(duì)色譜峰面積進(jìn)行積分處理。每個(gè)濃度點(diǎn)都有它的色譜峰，對(duì)應(yīng)到它的峰面積，在表格中就可以擬合出來(lái)標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，相關(guān)系數(shù)R2需大于0.999。

4.樣品測(cè)定

吸取10ul的樣品溶液，進(jìn)樣到HPLC中，可以自動(dòng)進(jìn)樣，也可選擇手動(dòng)進(jìn)樣，記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰面積。將峰面積代入到回歸方程，計(jì)算出進(jìn)樣的溶液的熊果苷的含量，樣本的含量需要考慮到稀釋倍數(shù)。