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亞油酸是一種不飽和脂肪酸,主要是來源于植物的油中,比如葵花籽油,玉米油,大豆油,亞麻籽油等。堅(jiān)果和種子中的葵花籽,南瓜籽,核桃,松子,芝麻等。谷物種的小麥,糙米,燕麥,黃豆,黑豆,鷹嘴豆等。在動(dòng)物的雞肉,蛋黃,牛肉,豬肉等也有少量的亞油酸,但需要適量的控制攝入量。亞油酸是人和動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)中必需的脂肪酸,是合成前列腺素的前體,缺乏會(huì)導(dǎo)致代謝障礙?;瘜W(xué)式為C18H32O2,分子為280.44,不溶于水,但易溶于乙醇,乙醚,氯仿,苯等有機(jī)溶劑。
檢測(cè)樣本中的亞油酸含量,科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)一般用到氣相色譜(GC)法。
1.樣品處理
稱取一定量的植物油或其他樣本,加入KOH甲醇溶液進(jìn)行甲酯化反應(yīng)。詳細(xì)的操作方法,相關(guān)文獻(xiàn)或標(biāo)準(zhǔn)上有,也可以參考之前的操作經(jīng)驗(yàn)。通過回流冷凝,有機(jī)溶劑提取等過程,獲得待測(cè)的溶液。
2.色譜條件
可以用毛細(xì)管色譜柱,也用脂肪酸專用色譜柱DB-23,檢測(cè)器用的是氫火焰離子檢測(cè)器(FID),進(jìn)樣器穩(wěn)定250℃,檢測(cè)器280℃,設(shè)置氫氣流速為30ml/min,N2為30ml/min,空氣為300ml/min,分流比50:1,柱箱:程序升溫 初始溫度 50℃保持 1min,然后以 25℃/min 升到175℃,保持 0min,以 4℃/min 升到230℃,保持 10min流量:1.3ml/min,進(jìn)樣量: 1μL。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線
采用亞油酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行溶解并用有機(jī)溶劑成倍稀釋,配制6個(gè)不同的濃度點(diǎn),盡可能的覆蓋到樣品溶液的濃度范圍。比如0.0003mg/mL,0.001mg/mL,0.005mg/mL,0.03mg/mL,0.13mg/mL,0.53mg/mL。依次進(jìn)樣到氣相色譜,依據(jù)上述的色譜條件,記錄對(duì)應(yīng)的色譜峰。對(duì)色譜峰面積進(jìn)行手工或自動(dòng)積分,對(duì)應(yīng)到它的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線,相關(guān)系數(shù)r2需要大于0.999接近于1,曲線要經(jīng)過原點(diǎn)。
4.含量計(jì)算
將樣品測(cè)出來的色譜峰面積,代入到回歸方程中,可以計(jì)算出樣品中的亞油酸的含量。