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番瀉苷含量檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-05-12 | 21 次瀏覽 | 分享到:
番瀉苷是從豆科植物番瀉中提取出來的一種天然蒽醌類有機物,常見的成分包括番瀉苷A和番瀉苷B,一般需要經(jīng)過腸道細菌的分解后才能轉化為活性物質(zhì)。番瀉苷A和B的化學式都是C42H38O20,分子量方面有一點點的差別。如番瀉苷A的分子量是862.74,而番瀉苷B的分子量是863.74,差1個質(zhì)量單位。番瀉苷A不溶于水、苯、醚和氯仿;微溶于甲醇、丙酮和二氧六環(huán);溶于碳酸氫鈉水溶液。番瀉苷B不溶于水,微溶于甲醇和二甲基亞砜(DMSO),溶于二氧六環(huán)和甲醇。在科研角度來說,它可以刺激腸道神經(jīng),增強腸道蠕動,并抑制水分吸收。

番瀉苷是從豆科植物番瀉中提取出來的一種天然蒽醌類有機物,常見的成分包括番瀉苷A和番瀉苷B,一般需要經(jīng)過腸道細菌的分解后才能轉化為活性物質(zhì)。番瀉苷A和B的化學式都是C42H38O20,分子量方面有一點點的差別。如番瀉苷A的分子量是862.74,而番瀉苷B的分子量是863.74,差1個質(zhì)量單位。番瀉苷A不溶于水、苯、醚和氯仿;微溶于甲醇、丙酮和二氧六環(huán);溶于碳酸氫鈉水溶液。番瀉苷B不溶于水,微溶于甲醇和二甲基亞砜(DMSO),溶于二氧六環(huán)和甲醇。在科研角度來說,它可以刺激腸道神經(jīng),增強腸道蠕動,并抑制水分吸收。


檢測方法:高效液相色譜(HPLC),液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)等。以番瀉苷A為例,簡單介紹一下HPLC測定的過程。


1.樣品處理


將干燥的植物樣本進行粉碎過篩處理,精密稱量0.5g,放入具塞錐形瓶中,加入50%的甲醇30ml,超聲30min,冷卻后用50%甲醇補充足失去的重量。過濾,精確量取10ml到25ml容量瓶中,用50%甲醇定容,0.45um膜過濾,待測。處理的方法,不是固定不變的,根據(jù)樣本的實際情況或環(huán)境進行調(diào)整。


2.色譜條件


C18的色譜柱,250mm長,4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑;柱溫25℃。以甲醇和0.5%磷酸溶液為流動相,等度洗脫,或乙腈-水-冰醋酸等度洗脫,流速1ml/min。紫外檢測器,波長340nm,進樣量10uL。理論塔板數(shù)不低于3000,僅供參考。


3.標準曲線


稱取番瀉苷A的標準品適量,使用50%甲醇溶解配制成1mg/mL的溶液。并進行梯度稀釋成6個不同的濃度點,最低點和最高點要在檢測器有效范圍內(nèi),確保檢測限。HPLC進樣測出各個濃度的色譜峰,記錄色譜峰的位置,并對色譜峰面積進行積分。對應它的標準溶液濃度,可以在表格中繪制出標準曲線,得到回歸方程,相關系數(shù)r2>0.999。在必要的時候,計算重復性,精密度,加標回收率等。


4.樣品測定和含量計算


將制備好的樣品溶液,進樣到HPLC,以和標準品相同的色譜條件,在軟件中記錄色譜峰。通過保留時間可以識別出目標的色譜峰,并對它的面積進行手工或自動積分。代入到回歸方程,可以計算出番瀉苷A含量。


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