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松果菊苷含量測(cè)定方法
來(lái)源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-05-09 | 31 次瀏覽 | 分享到:
松果菊苷是從管花肉蓯蓉或松果菊中提取出來(lái)的一種天然的苯乙醇苷類化合物,具有抗氧化,抗炎,抗疲勞,調(diào)節(jié)免疫,保護(hù)神經(jīng)等作用,目前停留在研究階段,比如抑制NF-κB等炎癥通路,降低促炎因子(如TNF-α、IL-6)釋放。從結(jié)構(gòu)上來(lái)看,是它有苯乙醇苷元和糖基結(jié)合而成的,是水溶性的酚類化合物。化學(xué)式為C35H46O20,分子量為786.73,易溶于甲醇、乙醇等有機(jī)溶劑。

松果菊苷是從管花肉蓯蓉或松果菊中提取出來(lái)的一種天然的苯乙醇苷類化合物,具有抗氧化,抗炎,抗疲勞,調(diào)節(jié)免疫,保護(hù)神經(jīng)等作用,目前停留在研究階段,比如抑制NF-κB等炎癥通路,降低促炎因子(如TNF-α、IL-6)釋放。從結(jié)構(gòu)上來(lái)看,是它有苯乙醇苷元和糖基結(jié)合而成的,是水溶性的酚類化合物。化學(xué)式為C35H46O20,分子量為786.73,易溶于甲醇、乙醇等有機(jī)溶劑。


測(cè)定松果菊苷的含量,一般實(shí)驗(yàn)室采用高效液相色譜(HPLC)或液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)法。


1.樣本制備


將樣本進(jìn)行粉碎研磨,過(guò)四號(hào)篩,精密稱取1g,放入100ml的棕色容量瓶中,加入50%的甲醇50ml,塞住塞子,搖晃均勻,浸泡30min,超聲處理40min,放冷后用50%甲醇補(bǔ)足丟失的重量,搖勻后靜置,過(guò)濾,待測(cè)。


2.色譜方法


C18色譜柱,250mm長(zhǎng),4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑;柱溫30℃。以乙腈和0.4%磷酸為流動(dòng)相梯度洗脫,或以甲醇和0.1%甲酸為流動(dòng)相梯度洗脫,流速1mL/min。紫外檢測(cè)器,波長(zhǎng)330nm,進(jìn)樣量10uL。


3.標(biāo)準(zhǔn)曲線


精密稱取適量的松果菊苷的標(biāo)準(zhǔn)品,加入50%甲醇溶液,制成0.2mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,梯度稀釋6個(gè)濃度點(diǎn),在檢測(cè)限的有效范圍內(nèi)。進(jìn)樣到HPLC,以上述的色譜方法,測(cè)出各個(gè)濃度的色譜圖,記錄色譜峰的保留時(shí)間和面積。對(duì)色譜峰的面積進(jìn)行積分,結(jié)合對(duì)應(yīng)點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程,相關(guān)系數(shù)r2需要大于0.999。


4含量計(jì)算


樣品的測(cè)定過(guò)程和標(biāo)準(zhǔn)品是相似的,在實(shí)際操作的過(guò)程中可能因?yàn)殡s質(zhì)或色譜柱出現(xiàn)堵塞,破損等問題而導(dǎo)致出峰不規(guī)則,需要參考相關(guān)的經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行調(diào)整。根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間,識(shí)別出樣本溶液對(duì)應(yīng)的松果菊苷的色譜峰。對(duì)色譜峰進(jìn)行積分,代入到標(biāo)準(zhǔn)曲線,可以計(jì)算出松果菊苷的含量。


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