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戊酸是一種短鏈脂肪酸,化學(xué)式為C5H10O2,分子量為102.132,能與乙醇、乙醚混溶,主要用作香料。戊酸的味道不好聞,就像臭襪子的氣味;如果合成戊酸酯,味道就好多了,還能用在化妝品或香水中。主要存在多年生的開花植物纈草中,通過蒸餾提取出來的。除了從天然植物中提取,還可以用人工合成的方法制備出來,需要一系列的化學(xué)氧化,蒸餾,萃取工藝。戊酸的同分異構(gòu)體,包括羧酸和酯兩類。
檢測樣品中的戊酸含量,主要包括氣相色譜(GC)法、高效液相色譜(HPLC)法、質(zhì)譜(MS)法等。這里以氣相色譜(GC)法為例,簡單的介紹一下流程。
1.樣品處理
就是將戊酸從樣品中提取出來,這就要考慮它的物理和化學(xué)性質(zhì),保存它的特點(diǎn)。將樣品粉碎,有機(jī)溶劑溶解,混勻,13000r/min離心20min,取上清液1mL過0.45μm 濾膜,待測。
2.色譜條件
不同的機(jī)器,實(shí)驗(yàn)過程的條件也是有所差異的。比如,采用DB-FFAP毛細(xì)管柱,柱溫是程序升溫,初始溫度 80℃保持 10min,然后以 10℃/min 升到250℃,保持8min。流動(dòng)相是氣體,N2的流量為3ml/min,H2的流量為60ml/min,空氣流量300ml/min,樣品流速1ml/min,分流比20:1,進(jìn)樣量1ul。使用FID檢測器,檢測器溫度300℃。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線
儲(chǔ)備液(10mg/mL):精確稱取各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品100mg于10mL容量瓶中,加入適量20%磷酸水溶解定容搖勻得1mg/ml單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)母液,-20℃避光儲(chǔ)存。
混合中間液(1mg/mL):準(zhǔn)確計(jì)算并吸取相應(yīng)體積的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,用20%磷酸水配制。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線用20%磷酸水配置。
梯度稀釋5-7個(gè)點(diǎn),上機(jī)測試,根據(jù)色譜峰面積或峰高,結(jié)合對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,在坐標(biāo)軸上描點(diǎn),繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程,相關(guān)系數(shù)r2>0.999。
4.樣品測定
上機(jī)操作的條件和標(biāo)品一樣的,將樣品測出來的色譜峰面積,代入到回歸方程,可以計(jì)算出樣品中的戊酸含量。