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植物組織淀粉含量檢測
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-07-10 | 154 次瀏覽 | 分享到:

淀粉是一種高分子碳水化合物,是由葡萄糖分子聚合而成的。淀粉有直鏈淀粉,也有支鏈淀粉,其中直鏈淀粉是沒有螺旋結(jié)構(gòu)的。而支鏈淀粉是20-30個(gè)葡萄糖殘基,以α-1,4-糖苷鍵首尾相連而成,在支鏈的地方是用α-1,6-糖苷鍵連接的。淀粉屬于多聚葡萄糖,分子為(C6H10O5)n,其中n為不定數(shù)。



直鏈淀粉有幾百個(gè)葡萄糖單元,支鏈淀粉有上千個(gè)葡萄糖單元。直鏈淀粉一端為非還原端,另外一端為還原端。而支鏈淀粉具有一個(gè)還原端和很多個(gè)非還原端。當(dāng)用碘溶液檢測的時(shí)候,直鏈淀粉會呈深藍(lán)色,支鏈淀粉會呈紫紅色。淀粉具有豐富的可再生資源、可降解性和可溶性,因此被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化工等領(lǐng)域。



檢測植物組織中的淀粉含量,一般可以采用比色法進(jìn)行。檢測原理:提取植物組織中的淀粉,淀粉是由葡萄糖殘基組成的,當(dāng)在酸性條件下的時(shí)候加熱,可以水解為葡萄糖。然后,在硫酸的作用下,能夠使得葡萄糖氧化脫水生成糖醛類化合物。此時(shí),利用苯酚或蒽酮試劑和糖醛化合物發(fā)生顯色反應(yīng),在分光光度計(jì)最佳波長處測定吸光度值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,可以計(jì)算出樣品中的淀粉含量。



這個(gè)實(shí)驗(yàn)考察的是基本功,準(zhǔn)備必要的檢測試劑,比如硫酸、蒽酮試劑等。準(zhǔn)確稱取標(biāo)準(zhǔn)淀粉,加入一定量的熱蒸餾水,放入沸水浴中煮沸0.5h,冷卻后用蒸餾水稀釋至刻度,制成1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在吸取5ml,加蒸餾水稀釋定容到50ml,即0.1mg/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液。


對標(biāo)準(zhǔn)淀粉溶液進(jìn)行梯度稀釋,可以取6個(gè)點(diǎn),每個(gè)點(diǎn)2個(gè)重復(fù),空白為蒸餾水代替。由于淀粉分為直鏈淀粉和支鏈淀粉,需要通過掃描的方式,分別確定直鏈淀粉和支鏈淀粉最佳檢測波長。根據(jù)濃度關(guān)系,制作對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。


對樣品進(jìn)行處理:將提取可溶性糖之后的殘?jiān)迫?0ml容量瓶中,加20ml熱蒸餾水,放入沸水浴中煮沸15min,再加9.2mol/L高氯酸2ml提取15min,冷卻,混勻,過濾,定容。在分光光度計(jì)上最佳波長處,檢測吸光度值,可以做幾個(gè)重復(fù),求取平均值。


淀粉水解的時(shí)候,在單糖殘基上加了一個(gè)水分子。因此,在計(jì)算淀粉含量的時(shí)候,將得到的糖量x0.9,才能扣除掉加上的水分子量,以得到實(shí)際的淀粉含量。


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