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蘋果酸含量檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2024-07-09 | 380 次瀏覽 | 分享到:

蘋果酸有L-蘋果酸、D-蘋果酸和DL-蘋果酸3種異構(gòu)體。天然存在的蘋果酸都是L型的,幾乎存在于一切果實中,以仁果類中最多。可以通過天然發(fā)酵、人工合成等方法獲取。蘋果酸的口感比較豐富,接近天然果汁并具有香味。能夠保持肌膚健康,比如輕微的去除老化的角質(zhì),促進(jìn)肌膚的新陳代謝,保持年輕的光彩。對腸胃有一定的刺激作用,適量的蘋果酸有助于消化食物,讓腸道更潤滑,預(yù)防便秘。



當(dāng)然,蘋果酸還可以減肥瘦身。但是呢,不能過量的飲用蘋果酸,如果腸胃中累積大量的酸,會引起惡心的情況。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,蘋果酸可以用于生產(chǎn)治療肝功能不全特別是高血壓癥的有效藥物。



檢測植物樣本中的蘋果酸含量,方法主要有酸堿滴定法、高效液相色譜(HPLC)法。


1.酸堿滴定法


檢測原理:用已知濃度的堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液去滴定樣品溶液,根據(jù)滴定的數(shù)據(jù),計算出樣品中的總酸度。在滴定的過程中,使用酚酞指示劑,當(dāng)溶液變色保持30秒不褪色,就是滴定終點了。這種方法是最簡單的檢測方法,也相對比較粗略一些。如果要更準(zhǔn)確、更精準(zhǔn)的數(shù)據(jù),可以采用高效液相色譜法測定。


2.高效液相色譜(HPLC)法



此法采用了HPLC的色譜柱和流動相來分離和檢測蘋果酸,具有高靈敏度、高分辨率、高準(zhǔn)確性的特點。方法包括了樣品的制備、色譜條件的選擇和確認(rèn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作、樣品測定和結(jié)果計算等過程。簡單的說,選擇適當(dāng)?shù)奶O果樣本進(jìn)行處理,比如破碎、攪拌、獲得均勻的溶液,需要注意的是不要破壞蘋果酸。接著,選擇適合分離出蘋果酸的色譜柱安裝上,調(diào)整流動相的組成和比例,設(shè)置合適的流速和檢測波長。使用蘋果酸的標(biāo)準(zhǔn)品,梯度稀釋,配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,通過HPLC檢測各個濃度的色譜峰。根據(jù)峰高或峰面積和濃度的線性關(guān)系,繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。最后,將制備好的樣本溶液,注入HPLC中,記錄蘋果酸的色譜峰,并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算出樣本中的蘋果酸含量。


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