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乙醇酸是從一些水果中提取,如檸檬、甘蔗、蘋果等。化學式為C2H4O3,分子量為76.05,溶于水,溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯等有機溶劑,不溶于烴類。乙醇酸含有一個羧基和一個羥基,具有羧酸和醇的雙重性質(zhì),既能是生成酸鹽,也能生成酯。乙醇酸用于日用化工,電鍍和表面處理,化學清洗,生物降解材料的合成,工業(yè)殺菌等領(lǐng)域。
檢測樣品中的乙醇酸含量,實驗室一般會用到高效液相色譜(HPLC),氣相色譜(GC),液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS),酸堿滴定等方法。這里,著重用HPLC來介紹一下乙醇酸含量的測定方法。
1.樣品處理
固體的樣品,就需要粉碎成末,稱取1g放入到50ml容量瓶中,加入45ml的乙酸乙酯,超聲30min,靜置過夜,用乙酸乙酯定容。過濾,取25ml出來蒸干。再用甲酸溶解,定容到10ml,待測。
2.色譜條件
采用常規(guī)的C18色譜柱,250mm長,4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑,柱溫30-35℃;用0.1 mol/L (NH4)2HPO4(pH值為2.4)溶液和乙腈為流動相,等度洗脫,流速為1ml/min。紫外檢測器,波長214nm,進樣量10uL,僅供參考。需要根據(jù)實際情況,判斷和選擇。
3.標準曲線
取20mg的標準品,溶解并稀釋成6個梯度的標準溶液。在理想的色譜條件下,分別進樣到HPLC中,對峰進行標記。其實,有特征的就是出峰時間。對各個色譜峰的峰面積進行手動或自動的積分處理,在表格中用函數(shù)對應(yīng)各個濃度,繪制出標準曲線圖,上面可以得到回歸方程。需要注意的是相關(guān)系數(shù)r2需要大于0.999,在有的地方需要對方法學進行驗證,如重復(fù)性,精密度,加標回收率,檢測限,定量限等。
4.樣品測定
測定過程是相似的,色譜條件是相同的,對獲得的色譜峰進行面積積分。代入到回歸方程,就能得到乙醇酸的含量。